شناسائی فیتوپلاسماهای همراه زوال زردآلو در استان خراسان رضوی

XML
کد مقاله : 1350-23IPPC
نویسندگان
1مشهد-طرق- روبروی پلیس راه- مرکز تحقیقات و آموزش کشاورزی
2حفظ نباتات استان خراسان رضوی سارمان جهاد کشاورزی خراسان رضوی
3روبروی پلیس راه طرق- مرکز تحقیقات و آموزش کشاورزی و منابع طبیعی خراسان رضوی- صندوق پستی 488-91735 - کد پستی 9165961664
چکیده
با توجه به اهمیت باغبانی در اقتصاد کشاورزی ایران و مزیت نسبی محصولات باغی نسبت به محصولات زراعی ، لزوم توسعه کشت و صادرات محصولات باغی حائز اهمیت می باشد. کمبود آب استان خراسان رضوی مزیت نسبی باغات را درخور توجه نموده است..یکی از محصولات عمده باغبانی در استان خراسان رضوی زردآلو می باشدکه سطح زیر کشتی حدود 4300 هکتار و باعملکرد تقریبی 2/4 تن را به خود اختصاص داده است . ارقام لاسجردی و شاهرودی دو رقم بومی هستند که برای تازه خوری و تهیه برگه استفاده می شود. در طی بازدید سالهای 1394 و 1395 از باغات زردآلو شهرستانهای مه ولات و خواف از استان خراسان رضوی علایم زوال زردآلو مشاهده گردید. علایم اندامهای هوایئ شامل زردی، فنجانی شدن و قاشقی شدن برگها و بدنبال آن سوختگی حاشیه برگها، کوچک ماندن برگها و ریزش میوه ها و کاهش رشد از علایم مشخصه این عارضه می باشد و همچنین زردی قبل موعد برگها در پائیز مشاهده گردید. گیاهان آلوده در طی یک تا دو سال از بین میروند. خشکسالی ها و افزایش درجه حرارت باعث تسریع و توسعه شدید علایم می گردد.جهت انجام آزمایش ابتدا از نمونه های برگی اسیدهای نوکلئیک استخراج شد. شناسائی فیتوپلاسماها با استفاده از 20 نانو گرم اسید نوکلئیک به کمک واکنش زنجیره ای پلی مراز مستقیم((PCR با استفاده از دو جفت آغازگر عمومی (P1/P7) فیتوپلاسماها و سپس از آغازگرهای R16F2n/R2 و R16(I)F1/R1با استفاده از روش nested PCR انجام شدتشخیص فیتوپلاسماهای ردیابی شده به کمک آنالیز RFLP با استفاده از آنزیمهای برشی TruI, HhaI, HinfI, Bstu1 و MboII روی قطعات DNA تکثیر شده با آغازگر R16F2/R2 انجام گردید. قطعات هضم شده برروی ژل پلی اکریل آمید 7/6 درصد توسط الکترو فورز جدا و بااتیدیوم برماید رنگ آمیزی گردید. براساس آنالیز فیلو ژنتیکی فیتوپلاسماهای جدا شده از نمونه های زردآلو بصورت توام مرتبط با دو گروه از فیتوپلاسما ها یک گروه (Stolbur)16SrXII و دیگری (Aster yellows) 16SrI بودند. اولین ردیابی اینگونه پاتوژنها نه تنها روی درختان زردآلو بلکه تهدیدی برای سایر محصولات کشاورزی منطقه بشمار می اید.
کلیدواژه ها
موضوعات
 
Title
Identification of phytoplasmas associated with apricot showing decline symptoms in Khorasan- Razavi province
Authors
MAHMOUD REZA KARIMI SHAHRI, SEYED MAHMOUD SAJADINEJAD, Hashem Kamali
Abstract
Given the importance of horticulture as Iran agricultural economy and based on relative advantages of horticultural crops compare to other crops, cultivation development and export of the horticulture products is important.The lack of water in Khorassan provicehas given the gardens a relative advantage. One the most important apricot-growing area is Razavi-Khorassan province. A total Khorasa area of cultivated apricot approximately 4300 ha and production of fresh fruit is 4 tons per years 'Shahroodi' and 'Lasjerdi' are the main native apricot varieties grown for dry and fresh consumption.During field survey in 2015-2016 of apricot orchards in Mahvelat and Khaf regions of Razavi-Khorassan province were observed apricot decline. Trees exhibit foliar yellowing, accompanied by leaf rolling, followed by marginal brown necrosis, premature and small leaf and often even fruit dropping are the most common symptoms on apricot trees, growth depression, premature autumn discoloration. Drought condition and hot temperature speed up symptom developments.Symptoms and deaths of apricot trees were observed sporadically in orchards .Affected plants usually die within a year or two.Nucleic acid samples from leaf plants showing decline symptoms were collected and molecular analyses were carried out to verify phytoplasma presence and preliminary identify by RFLP analyses on R16F2n/R2 and R16(I)F1/R1 to obtained after nested PCR on P1/P7 amplicons. Identification of detected phytoplasmas was done by RFLP analyses on 100 to 200 ng DNA of amplicons with Tru1I, TaqI, RsaI and HhaIrestriction enzymes (Fermentas, Vilnius, Lithuania) according to the manufacturer’s instructions. The digested DNA fragments were separated by electrophoresis in a 6.7% polyacrylamide gel and stained with ethidium bromide.The most samples were positive in nested-PCR and phytoplasma detected could be affiliated to ribosomal groups 16SrXII-A phytoplasmas (“stolbur”), in a few cases these profiles were mixed with those of 16SrI-B (aster yellows) phytoplasmas .The first detection of these pathogens in the same species represents a big threat not only for the Iranian apricot cultivation, but also for agriculture in general, considering that all of them are infecting a high number of plant species.
Keywords
Stone fruit, leaf scorch, die back