- |
-
گونه های Phaeoacremonium همراه با زوال درختان سنجد (Elaeagnus angustifolia L.) در ایران
نویسندگان
1کرمان، بلوار 22 بهمن، میدان پژوهش، دانشگاه شهید باهنر، دانشکده کشاورزی، بخش گیاهپزشکی
2دانشگاه باهنر کرمان دانشکده کشاورزی بخش گیاه پزشکی
چکیده
درخت سنجد با نام علمی Elaeagnus angustifolia L. که به به طور معمول به عنوان زیتون بری، زیتون روسی و زیتون وحشی نیز شناخته می شود متعلق به خانواده Elaeagnacea می باشد. این گونه به طور معمول در کشور های آسیایی از جمله ایران، ازبکستان، سوریه و چین دیده می شود. بر اساس بررسی که در استان کرمان انجام شد نشانه هایی از بیماری شاخه و تنه به شکل سرخشکیدگی و شانکر شاخه بر روی درختان سنجد در راین دیده شد. نشانه هایی مشابه بر روی همین درخت در برخی از مناطق رابر در این استان نیز مشاهده گردید. بنابراین این مطالعه با هدف بررسی تنوع گونه های Phaeoacremonium همراه با این نوع نشانه های بیماری بر روی درخت سنجد در این مناطق انجام شد. نمونه برداری به صورت تصادفی از شاخه درختانی که دارای سرخشکیدگی و شانکر بودند صورت گرفت. همه نمونه های جمع آوری شده به آزمایشگاه منتقل و با تهیه برش های عرضی تغییر رنگ داخلی بافت چوب در آنها مورد بررسی قرار گرفت. پوست خارجی در هر نمونه توسط یک اسکالپل برداشته شد و در مرحله بعد با الکل اتیلیک 96% و سوزاندن با شعله ضد عفونی سطحی گردید. سپس در شرایط استریل تکه های کوچکی (4× 4 میلیمتر) از مرز بین بافت سالم و آلوده چوب توسط یک اسکالپل استریل شده برداشته و به طور مستقیم بر روی محیط کشت عصاره سیب زمینی-دکستروز-آگار (PDA) قرار داده شد. پرگنه های قارچی بعد از نگهداری تشتک های پتری در دمای 25 درجه سانتی گراد و به مدت 5 تا 10 روز به محیط کشت جدید PDA منتقل شدند. در ابتدا همه جدایه های بدست آمده بر اساس پرگنه (شکل، رنگ و تولید رنگدانه زرد بر روی محیط کشت) و ویژگی های میکروسکوپی (شکل کنیدیوفور، نوع و شکل فیالید، اندازه و شکل کنیدیوم و اندازه زگیل های روی ریسه) گروهبندی شدند. شناسایی جدایه ها با تکثیر ژن بتاتوبولین توسط آغازگرهای T1 و Bt2b و مقایسه آنها با ترادف های معتبر موجود در بانک ژن مورد تایید قرار گرفت. در این مطالعه 21 جدایه مشابه با گونه های Phaeoacremonium از درختان سنجد با نشانه های بیماری جداسازی گردید. بر اساس ویژگی های ریخت شناختی و مولکولی جدایه های مذکور به عنوان Phaeoacremonium parasiticum (12 جدایه)، Pm. alvesii (چهار جدایه) و Pm. italicum (پنج جدایه) شناسایی شدند. این مطالعه اولین گزارش از وجود گونه های Phaeoacremonium بر روی درخت سنجد در دنیا می باشد.
کلیدواژه ها
موضوعات
Title
Phaeoacremonium species associated with Russian olive (Elaeagnus angustifolia L.) decline in Iran
Authors
Hamid Mohammadi, maryam asadi
Abstract
Elaeagnus angustifolia L., which is commonly known as oleaster, Russian olive and wild olive, belongs to Elaeagnacea family. This species is mostly found in Asian countries such as Iran, Uzbekistan, Syria and China. During a field survey in Kerman province trunk disease symptoms including dieback and branch canker were observed on Russian olive in Rayen. Similar symptoms were also noticed on the same tree in some regions of Rabor. Therefore, the goal of this study was to investigate the diversity of Phaeoacremonium species associated with trunk diseases of Russian olive in these regions. Samples of branches showing canker and dieback symptoms were collected from trees randomly selected. All samples were brought to the laboratory and transversal cuts were made to observe any internal wood discoloration. The outer bark surface of each sample was cut away with a scalpel and superficially disinfected with ethyl alcohol 96 % and flame. Small sections (4x4 mm) from the margin between healthy and necrotic wood tissues were aseptically removed with a scalpel and placed onto potato dextrose gar (PDA) directly. After incubation at 25°C for 5-10 days, fungal colonies were sub-cultured onto fresh PDA. All isolates were initially grouped according to their colony (morphology, color and yellow pigment production in culture) and microscopic characters (conidiophore, phialide type and morphology, conidial size and shape and the size of hyphal warts). Identifications were confirmed by comparing β-tubulin gene (BT) sequences amplified using primers T1 and Bt2b with reference sequences in GenBank. In this study 21 fungal isolates resembling of Phaeoacremonium species were obtained from trees showing disease symptoms. Based on morphological and molecular characteristics these isolates were identified a Pheaocaremonium parasiticum (12 isolates), Pm. alvesii (four isolates) and Pm. italicum (five isolates). This is the first report of Phaeoacremonium spp. on Russian olive in the world.
Keywords
Kerman province, dieback, canker, &beta, -tubulin gene, Elaeagnacea