دو گونه جدید از Neoscytalidium به عنوان عوامل شانکر ناتراسیایی در ایران

کد مقاله : 1455-23IPPC
نویسندگان
1شیراز- خوابگاه زند
2بخش گیاهپزشکی٬ دانشکده کشاورزی٬ دانشگاه شیراز٬ شیراز٬ ایران
3بخش گیاهپزشکی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه شیراز، شیراز، ایران
چکیده
شانکر ناتراسیایی یکی از مهم ترین عوامل بیماری زا در میزبان‌های مختلف در استان‌های مرکزی و جنوبی ایران می‌باشد. نمونه‌برداری در طی سال‌های 1396-1394 از شاخه‌های الوده با علایم سرخشکیدگی، شانکر همراه با شکاف خوردن پوسته و پودر سیاهرنگ زیر آن در استان‌های فارس، کرمان، خوزستان، سیستان و بلوچستان و هرمزگان انجام گرفت. قطعات کوچکی از بافت‌های نمونه‌ برداری شده پس از ضدعفونی در هیپوکلریت سدیم نیم درصد با آب سترون شست و شو داده شد. سپس بر روی محیط کشت PDA کشت و در دمای 25 درجه سانتی‌گراد قرار داده شدند. کلنی‌های رشد کرده به روش نوک‌ریسه و تک‌ اسپورکردن خالص‌سازی شدند. بر اساس ویژگی‌های ریخت-شناختی جدایه‌ها Neoscytalidium شناسایی شدند. شتاسایی با روش‌های مولکولی نیز تایید شد. اسخراج DNA به روش CTAB واکنش زنجیره‌ای پلیمراز با استفاده از اغازگرهایITS 1-ITS4 (از ناحیه (Internal Transcribed Spacer ، EF1-EF2 (از ناحیه Elongation Factor 1 alpha) و B-tubulin (از ناحیه Beta-tubulin) انجام شد. دمای بیشینه، بهینه و کمینه رشد به ترتیب 40، 35 و 15 درجه سانتی‌گراد اندازه گیری شد. بیماری‌زایی آنها بر روی شاخه‌های بریده افرا، توت ، نارون، عرعر، سیب، چنار، زیتون و پسته اثبات شد. بر اساس معیارهای مولکولی سه گونهNeoscytalidium novaehollandiae N.hyalinum, و N. dimidiatum از جنس Neoscytalidium شناسایی شدند که دو گونه آن برای ایران جدید می‌باشند. پرگنه N.hyalinum در ابتدا به حالت پودری سفید و با گذشت زمان کم‌کم به رنگ زیتونی روشن سفید دیده شدند ولی پرگنه N. novaehollandiae در ابتدا به رنگ زیتونی بوده و کم‌کم تیره‌ شدند. این مطالعه اولین گزارش N. hyalinum از ایران بر روی نخل خرما و N.novaehollandiae بر روی پرتقال، زیتون، نارون، انار، توت و انبه می‌باشد.
کلیدواژه ها
موضوعات
 
Title
Two new species of Neoscytalidium the causal agents of Nattrassia canker from Iran
Authors
zahra rahimi, Zia Banihashemi, maryam mirtalebi
Abstract
Nattrassia canker is one of the major pathogen of different plant species in southern and central provinces of Iran. During 2015-2016, disease samples showing dieback, canker with cortex flacking filled with black powder were collected from Fars, Kerman, Khozestan, Hormozgan, Isfahan and Sistan and Balochestan provinces. Symptomatic tissues were washed and surface sterilized in 0.5% sodium hypochlorite and small pieces were incubated on acidified PDA at 25oc. The growing colonies were purified using hyphal tip and single arthrospore. Using morphological features the isolates were identified as Neoscytalidium and the species were verified using molecular approach. DNA was extracted using CTAB method and PCR was conducted using primers ITS1-ITA4 (Internal Transcribed Spacer), EF1-EF2 (Elongation Factor 1 alpha) and b-tubulin A and B (Beta-tubulin).. The maximum. Optimum and minimum temperature for growth were respectively 40,35 and 15oc.The pathogenicity of the isolates was performed on detached stems of maple, mulberry, elm ,ailanto, apple, plane tree, olive and pistachio. Based on molecular criteria three species of Neoscytalidium Namely N. dimidiatum, N. hyalinum and N. novaehollandia were identified which the two latter species are new for Iran flora. Colony of N. hyalinum appeared as white powder which gradually changed to light olive but N. novaehollandia first appeared as olive and turned to dark color. This is the first report of appeared as olive and turned to dark color. This is the first report of N. hyalinum on date palm and N. novaehollandia from citrus, olive,elm ,pomegranate and mulberry from Iran.
Keywords: dieback, morphological, molecular, CTAB
Keywords
Keywords: dieback, morphological, molecular, CTAB