بررسی اثر برخی سودوموناد های جدا شده از فیلوسفر درختان میوه هسته دار علیه باکتری Pseudomonas syringae عامل شانکر
کد مقاله : 1393-23IPPC
نویسندگان
1خیابان کوهسنگی. حکیم نظامی32. ساختمان303
2گروه گیاهپزشکی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه فردوسی مشهد، ایران
3گروه گیاهپزشکی دانشکده کشاورزی دانشگاه فردوسی مشهد
چکیده
شانکر یکی از بیماری های مهم درختان میوه هسته دار در سطح جهان و به ویژه ایران است. با توجه به مشکلات کنترل آن با استفاده از آنتی بیوتیک ها و روش های مبارزه ی شیمیایی که برای سلامتی مصرف کنندگان خسارت به دنبال دارد و همچنین موجب مقاومت بیمارگرها می شوند، روش کنترل بیولوژیک می تواند به عنوان جایگزینی مناسب برای حفاظت از گیاهان مورد توجه قرار گیرد. در این تحقیق به منظور جداسازی باکتری های آنتاگونیست و عامل بیماری، به ترتیب از بافت های سالم و آلوده درختان میوه هسته دار آلو، هلو، شلیل، بادام، آلبالو وگیلاس باغ های شرق و غرب کشور نمونه برداری انجام گردید. سطح سرشاخه ها شستشو داده شد و با تهیه سری رقت، باکتری ها بر روی محیط KB تفکیک شدند. جدایه هایی که در زیر نور UV فلورسنت بودند، انتخاب و خالص سازی گردیدند. از 250 جدایه به دست آمده از نمونه های سالم، 28 جدایه دارای هاله بازدارندگی علیه عامل ایجاد کننده شانکر باکتریایی درختان میوه هسته دار بودند. لازم به ذکر است که عامل ایجاد کننده شانکر از درختان آلوده جداسازی شد و پس از انجام آزمون بیماریزایی بر روی نهالهای گیلاس در شرایط گلخانه ای به عنوان عامل بیمارگر در آزمونها مورد استفاده قرار گرفت. تاثیر آنتاگونیستی جدایه ها بر بیمارگر به روش ایجاد هاله ی بازدارندگی (آنتی بیوز) و تولید آنتی بیوتیک (آزمون کلروفرم) صورت گرفت. سودومونادهای دارای تاثیر آنتاگونیستی با استفاده از آزمون های لوپات و ملکولی مورد شناسایی قرار گرفتند. تمامی این جدایه ها متعلق به گونه P. fluorescens بودند. برای بررسی اثر آنتاگونیست ها در جلوگیری از رشد عامل بیمارگر در شرایط زنده، آزمون هایی بر روی شکوفه های درخت آلو طراحی و اجرا شد. تحلیل داده های این آزمون مشخص کرد که تیمارهای آنتاگونیستی به طور معنی داری موفق به جلوگیری از بلاست شکوفه ها شدند، به طوری که این تیمارها وقوع بیماری را بین 7/64 تا 6/89 % کاهش دادند. این یافته ها نشان دادند که 10 جدایه در این تحقیق، هم در شرایط آزمایشگاهی و هم در شرایط زنده توانستند بیماری را کنترل نمایند.
کلیدواژه ها
موضوعات
Title
Investigation of some antagonistic pseudomonads against Pseudomonas syringae the causal agent of canker
Authors
sara memari, Saeed tarighi, Mojtaba Mamarabadi
Abstract
Canker is one of the most important diseases of stone fruit trees in the world and especially in Iran. Regarding its control problems using antibiotics and also because chemical methods are harmful to the health of consumers and cause resistance in pathogens, biological control can be used as an beneficial alternative to plant protection. In this study, in order to isolate the antagonistic bacteria and the disease agent, healthy and infected tissues of the fruit trees of the plum, peach, nectarine, almond, sweet cherry and sour cherry were sampled from the East and the West of Iran. The surfaces of the branches were washed and by the use of serial dilutions the bacteria were isolated on the KB medium. The isolates that produced fluorescence light under UV were selected and purified. For selected Pseudomonas syringae from infected tissues which were identified by LOPAT tests, pathogenicity were studied. 250 isolates detected from healthy samples were tested against infectious bacteria identified from infected samples. In order to study the effect of these antagonists against the pathogenic bacteria, a growth inhibitor (antibiosis) and antibiotic production (chloroform test) were used. 28 isolates with inhibitory halo against the causative agent of canker were identified by physiological, biochemical and morphological tests. All of these isolates were belonged to the P. fluorescens species. To investigate the effect of antagonists on preventing growth of the pathogenic agent in living conditions, tests were carried out on plum blossom trees. Analysis of data showed that the antagonistic treatments successfully prevented the blossom blast, so that the treatments reduced the incidence of disease from 64.7 to 89.6%. These findings showed that 10 isolates were successful in controlling the disease both in vitro and in vivo conditions.
Keywords
Antibiotic, Antibiosis, biological control, P. fluorescens