کنترل زیستی Macrophomina phaseolinaعامل بیماری پوسیدگی ذغالی با استفاده از باکتری Streptomyces در شرایط آزمایشگاه

کد مقاله : 1390-23IPPC
نویسندگان
1روستای مازیاران- خیابان شهید خاندوزی- کوچه امام سجاد
2گروه گیاهپزشکی دانشکده تولید گیاهی انشگاه علوم کشاورزی و منابع طبیعی گرگان
3گروه آموزشی
چکیده
بیماری پوسیدگی ذغالی در ایران از پراکندگی جغرافیایی بالایی برخوردار است و گزارشهای متعددی از وجود آن بر روی گیاهان مختلف گزارش شده است. به منظور بررسی قدرت آنتاگونیستی پنج جدایه 36، 39، 46، 47 و 63 Streptomyces در برابر چهار جدایه M0، M2، M4 و M6 Macrophomina phaseolina از روش کشت دو طرفه یوآن و کراوفورد استفاده شد. تاثیر متابولیت‌های فرار جدایه‌های باکتری در جلوگیری از رشد قارچ عامل بیماری با استفاده از روش فیدامن و دروزال انجام شد. جهت تهیه کشت چمنی باکتری سوسپانسیونی از اسپور باکتری با غلظت cfu/ ml 108 تهیه شد و بر روی پلیت حاوی محیط سیب‌زمینی دکستروز آگار(PDA) پخش شد. پس یک دیسک پنج میلی متری از حاشیه پرگنه جوان قارچ در مرکز پلیت حاوی محیط سیب‌زمینی دکستروز آگار قرار داده شد. هر دو پلیت به صورت رو در رو قرار گرفته و با استفاده از پارافیلم به یکدیگر وصل شدند. نتایج آزمون کشت دو طرفه نشان داد که سه جدایه 36، 46 و 47 به ترتیب دارای 35، 41 و 42 درصد اثر بازدارندگی روی رشد میسلیومی قارچ بودند. اثرات آنتاگونیستی پس از دو روز بروز و در روزهای بعدی پیشرفت کرد. از نظر آماری بین جدایه 36 و 46 و جدایه 36 و 47 در سطح احتمال 5% اختلاف معنی‌داری وجود داشت. آزمون احیاء‌پذیری نشان داد که پس از پنج روز انکوباسیون، میسلیوم‌های قارچ، واقع در حاشیه ناحیه بازدارندگی کشت متقابل هر پنج جدایه باکتری در محیط کشت تازه قابلیت رشد داشتند. در آزمون ترشحات فرار هر سه جدایه 36، 46 و 47 توانستند به خوبی از رشد میسلیوم قارچ بیمارگر جلوگیری کنند. جدایه 46 و 47 با 65 و 57 درصد و جدایه 36 با 50 درصد بازدارندگی تقریبا رشد پرگنه قارچ را متوقف کردند. از نظر آماری تفاوت تاثیر ترشحات فرار سه جدایه معنی‌دار نبود و میزان بازدارندگی از رشد در بین جدایه‌های M. phaseolina یکسان بود. این آزمایش در قالب طرح کامل تصادفی با 20 تیمار و 4 تکرار انجام شد.
کلیدواژه ها
موضوعات
 
Title
Macrophomina phaseolina bioaccumulation as a causative agent of charcoal decay using Streptomyces bacteria under laboratory conditions
Authors
Soghra Alimardany, Seyed Esmail Razavi, seyed javad sanei
Abstract
Charcoal rot disease in Iran has a high geographical dispersion and there are numerous reports of its presence on different plants. In order to investigate the antagonistic power of five isolates of Streptomyces 36, 39, 46, 47 and 63 against the four isolates of Macrophomina phaseolina M0, M2, M4 and M6, two-way culture of Yuan and Crowford was used. The effect of volatile metabolites of bacterial isolates on preventing growth of fungi caused by the disease was done using the Fedamen and Dorzal method. A culture of bacterial spores with 108 cfu / ml (colony forming units per mililitr) was prepared to make the saponification culture and was spread on a plate containing potato dextrose agar (PDA). A five-millimeter disk of the young perineum of the fungus was placed in the center of the plate containing the dextrose agar apple. Both plates were placed face to face and connected to each other using parafilm. Two-way cultivars showed that 36 isolates, 46 and 47 isolates had 35, 41 and 42% inhibitory effect on mycelia growth of fungi, respectively. The antagonistic effects developed after two days and developed in the following days. There was a significant difference between isolates of 36, 46 and isolates of 36 and 47 at 5% probability level. The resuscitation test showed that after five days of incubation, the fungal mycelium, located on the margin of the reciprocal culture inhibitory zone of all five bacterial isolates, was able to grow in the new culture medium. In the volatile discharge test, all three isolates of 36, 46, and 47 could well prevent the growth of the mycelia of the pathogenic fungus. Isolates 46 and 47 with 65 and 57 percent, and isolate 36 with 50 percent inhibitory growth almost stopped the fungus colonies. Statistically, the difference in the effect of evapotranspiration in three isolates was not significant and the inhibitory effect on growth was similar between M. phaseolina isolates. This experiment was conducted in a randomized complete design with 20 treatments and 4 replications
Keywords
Macrophomina phaseolina, Streptomyces