گزارش تجمع پروتئاز تریتیسن آلفا گندم در روده حشرات کامل سن گندم با استفاده از تکنیک پروتئومیکس

کد مقاله : 1328-23IPPC
نویسندگان
1امیراباد- دانشکده کشاورزی- گروه گیاهپزشکی
2فارغ التحصیل
3بیرجند-دانشگاه بیرجند-دانشکده کشاوورزی- گروه گیاهپزشکی
چکیده
استفاده از تکنیک پروتومیکس برای شناسایی پروتئن هایی موثر و کلیدی در فرایندهای بیوشیمیایی حشرات از روشهای جدید در دنیای فیزیولوژی جانوری می باشد. مطالعه دستگاه گوارش حشرات و بخصوص سن گندم باعث شناسایی اهداف بالقوه مناسبی برای مدیریت آفات با تاکید بر مهار کننده ها و پروتئین های حشره کش می گردد. در این پژوهش حشرات کامل زمستانگذران بعد از دو روز تغذیه از گندم در آزمایشگاه برای تشریح دستگاه گوارش انتخاب گردیدند. پروتئین های روده این حشره با استفاده از الگوی الکتروفورز دو بعدی آشکار گردید. یک لکه پروتئینی مهم که در اکثر تکرارهای زیستی مشاهده گردیده بود ولی شناسایی نگردیده بود برای شناسایی انتخاب گردید. لکه هدف بریده شده و بعد از هضم با تریپسین برای شناسایی به دستگاه طیف سنجی جرمی تزریق گردید. طیف های بدست آمده بعد از جستجو در پایگاه داده مرکز ملی اطلاعات زیسن فنآوری با استفاده از منبع جانوران و گندم مورد تجزیه وتحلیل قرار گرفت و پروتئن هدف پروتئاز تریتیسین آلفا با شماره دسترسی gi 111073715 شناسایی گردید. ردیابی و شناسایی پروتئینهای گیاهی در روده حشرات نقطه عطفی در درک برهمکنش های گیاه- گیاهخوار در دنیای حشرات خواهد بود. در اینجا نیز محتمل است که پروتئاز وارد شده در روده سن گندم به عنوان منبع اسید آمینه ای مورد استفاده حشره قرار گیرد. اگر چه تا کنون تعدادی پروتئین دیگر شامل سرپین، دی هیدرواسکوربات ردوکتاز و بتا آمیلاز از گیاه گندم در روده حشرات کامل سن گندم توسط نگارندگان شناسایی شده است ولی به نظر میرسد مسیر پویای ارتباط سن گندم- گندم نیاز به مطالعات مولکولی بیشتری در آینده داشته باشد. تعیین نقشه پروتئومی برهمکنش سن گندم- گندم در زمان های مختلف قبل و بعد از تغذیه و همچنین قبل و بعد از اعمال یک تیمار خاص باعث شناسایی پروتئین های موثر در سیستم های فیزیولوژیکی این حشره خواهد شد.
کلیدواژه ها
موضوعات
 
Title
Report of accumulation of triticin-α from the wheat in the gut of Adult sunn pest using Proteomics technique
Authors
Mohammad Saadati, faeze rezaeisattar, Sadaf Nouripour
Abstract
Using of proteomic technique as powerful method to identify Physiological proteins of insects is new way in insect Physiology. Digestive system of the hemiptera consists from the salivary gland and alimentary canal. Proteome patterns of salivary gland and gut in the adult sunn pest and fifth- instar nymphs were determined with two dimensional electrophoresis by authors. The study of insect digestive system particularly sunn pest causes new potential targets in pest management. Any disruption in the normal process of insect nutrition can be reduced or suppressed feeding and assimilation in the insects. In this study, recurrent sunn pest after 2- days feeding were selected for dissection. Gut proteins visualized by two dimensional electrophoresis patterns. There were many spots in the proteome patterns that need to be identified. One of the main spots that not identified but exist in the all of replication was selected as target protein. This spot cut and digest with trypsin and then injected to liquid chromatography and mass spectrometry ( LC/ MS-MS). After analysis of resulted spectrums using National center of biotechnology information with two enteries Animals and wheat, target protein identifies as triticin-α of wheat. This result showed that accumulated plant protease in the gut of sunn pest can be used as a source of amino acids in the nutrition process. Although some of wheat proteins were identified by the authors (like serpin, beta amylase and dehydro ascorbat reductase) in the gut of sunn pest, but supplementary studies are necessary to detect effective proteins before and after feeding and before and after different treatments.
Keywords
Proteome, Inhibitor, Two dimensional electrophoresis, Mass spectrometry