گونه های Botryosphaeriaceae همراه با سرخشکیدگی و شانکر درختان زیتون در ایران

کد مقاله : 1298-23IPPC
نویسندگان
1کرمان- بلوار جمهوری- بلوار پزشک- کوی بهارستان- بلوک 40 شرقی- واحد 200
2کرمان، بلوار 22 بهمن، میدان پژوهش، دانشگاه شهید باهنر، دانشکده کشاورزی، بخش گیاهپزشکی
3بخش گیاهپزشکی٬ دانشکده کشاورزی٬ دانشگاه شیراز٬ شیراز٬ ایران
چکیده
گونه های خانواده Botryosphaeriaceae (Botryosphaeriales) دارای انتشار جهانی هستند و برخی از گونه های این خانواده به عنوان بیمارگرهای مهمی بر روی درختان مختلف در دنیا شناخته می شوند. به منظور شناسایی گونه های Botryosphaeriaceae همراه با بیماری های شاخه و تنه درختان زیتون یک بررسی بر روی درختان زیتون در نواحی مختلف کشت این محصول در دو استان کرمان و مازندران انجام شد. نمونه برداری در سال 1395 و از شاخه و تنه درختان زیتون که سرخشکیدگی، شانکر و همچنین تغییر رنگ بافت چوب داشتند انجام گردید. عمل جداسازی از بافت های تغییر رنگ یافته بافت چوب انجام شد. برای اینکار قطعات کوچکی ( 5× 5 میلی متر) از بافت آلوده چوب بریده شد و به مدت دو دقیقه در محلول هیپوکلریت سدیم نیم درصد گندزدایی و بعد از آن دو مرتبه نیز با آب سترون شستشو و سپس بر روی محیط کشت عصاره سیب زمینی-دکستروز-آگار (PDA) حاوی سولفات استرپتومایسین قرار داده شدند. در این مطالعه 22 جدایه قارچی شبیه به گونه های Botryosphaeriaceae (با رشد سریع و پرگنه های سبز خاکستری تا تیره) از درختان بیمار جداسازی گردید. جدایه های مورد نظر جهت تحریک به اسپورزایی به محیط کشت آب-آگار (WA) حاوی برگ های اتوکلاو شده کاج منتقل و به مدت دو تا پنج هفته در دمای اتاق و در زیر نور فلورسنت نگهداری شدند. شناسایی جدایه ها در ابتدا بر اساس ویژگی های ریخت شناختی مربوط به کنیدیوم ها (رنگ، اندازه و دیواره عرضی) انجام و تأیید شناسایی ریخت شناختی آنها نیز با تکثیر و تعیین ترادف بخشی از ژن فاکتور بسط دهنده نسخه برداری (EF-1α) با دو آغازگر EF1-728F و EF1-986R صورت گرفت. بر اساس ویژگی های ریخت شناختی و تجزیه و تحلیل داده های مولکولی چهار گونه از Botryosphaeriaceae به نام های Botryosphaeria dothidea (پنج جدایه)، Diplodia seriata (پنج جدایه)، Dothirella sarmentorum (هشت جدایه) و Lasiodiplodia theobromae (چهار جدایه) از درختان زیتون جداسازی و شناسایی شدند. این بررسی اولین گزارش از B. dothidea، D. seriata و L. theobromae از درختان زیتون در ایران می باشد. علاوه بر این مطالعه انجام شده اولین گزارش از Do. sarmentorum همراه با زردی، شانکر و سرخشکیدگی درختان زیتون محسوب می گردد.
کلیدواژه ها
موضوعات
 
Title
Botryosphaeriaceae species associated with the die-back and canker of olive trees in Iran
Authors
Mahboobeh Sohrabi, Hamid Mohammadi, Zia Banihashemi
Abstract
Species of the family Botryosphaeriaceae (Botryosphaeriales) have a worldwide distribution and some species of this family have been recognized as important pathogens on various trees worldwide. In order to identify the Botryosphaeriaceae spp. associated with olive trunk diseases, a survey was conducted on trees in different olive-growing regions in Kerman and Mazandaran provinces. In 2016, wood samples were collected from trunk and branches of trees showing dieback and canker as well as internal wood necrosis in cross sections. Fungal isolations were performed from discolored wood tissues. Small wood segments (5×5 mm) were cut from affected tissues and surface-sterilized in 0.5 % sodium hypochlorite for 2 min followed by two rinses in sterile distilled water and then placed on potato dextrose agar (PDA) amended with streptomycin sulphate. In this study 22 fungal isolates resembling Botryosphaeriaceae species in colony and culture (fast growing, greyish to dark cultures) were obtained from affected trees. To induce sporulation, fungal isolates were also sub-cultured on water-agar with autoclaved pine needles and stored for 2-5 weeks at room temperature under fluorescent white light. All isolates were identified tentatively by means of morphological features of conidia (size, colour and septation) and confirmed by partial sequences of the translation elongation factor 1-α gene (EF-1α) with the primer pairs EF1-728F and EF1-986R. Based on morphological and molecular analysis four species of Botryosphaeriaceae namely, Botryosphaeria dothidea (five isolates), Diplodia seriata (five isolates), Dothirella sarmentorum (eight isolates) and Lasiodiplodia theobromae (four isolates) were isolated and identified from olive trees. This study is the first report of B. dothidea, D. seriata, and L. theobromae from olive trees in Iran. In addition, this study is the first report of Do. sarmentorum associated with yellowing, canker and dieback symptoms of olive trees.
Keywords
: Fungal trunk pathogens, Kerman province, Mazandaran province, EF-1&alpha