مکانیسم‌های بیوشیمیایی دخیل در مقاومت بید کلم Plutella xylostella L. (Lep.: Plutellidae) به حشره‌کش فن‌والریت در چهار ناحیه مختلف ایران

کد مقاله : 1464-23IPPC
نویسندگان
1خیابان اردیبهشت مجتمع ارگ 5
2گروه حشره شناسی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران
3بخش تحقیقات آفتکشها، موسسه تحقیقات گیاهپزشکی کشور، تهران، ایران
چکیده
بید کلم، Plutella xylostella (L.) (Lep.: Plutellidae) یکی از شایع‌ترین و مخرب‌ترین آفات گیاهان خانواده چلیپائیان در ایران می‌باشد و جهت کنترل آن عمدتا از حشره‌کش‌های پایرتروئیدی نظیر فن‌والریت استفاده می‌شود. بعضی از جمعیت‌های P. xylostella به دلیل استفاده مکرر از این حشره‌کش مقاوم شده‌اند. تاکنون هیچ پژوهشی در مورد مکانیسم‌های مقاومت به فن والریت در P. xylostella انجام نشده است. سمیت فن‌والریت روی جمعیت بید کلم از چهار منطقه مختلف ایران (تهران، البرز، خوزستان و اصفهان) به روش غوطه‌ور کردن برگ اندازه‌گیری شد. نتایج زیست‌سنجی نشان داد که بین جمعیت‌ها‌ اختلاف معنی‌داری از نظر حساسیت به فن‌والریت وجود دارد. نسبت مقاومت در جمعیت‌ها نسبت به جمعیت حساس از 1/3 تا 5/9 متغیر بود. تأثیرات سینرژیستی توسط تری فنیل فسفات (TPP)، پی‌پرونیل‌بوتوکساید (PBO) و دی اتیل مالئات (DEM) روی جمعیت حساس و مقاوم به ترتیب جهت تعیین نقش آنزیم‌های استراز، مونواکسیژناز و گلوتاتیون اس‌ترنسفراز در مقاومت بید کلم به فن‌والریت مورد ارزیابی قرار گرفت. کاهش میزان مقاومت به فن‌والریت به وسیله TPP، PBO و DEM نشان داد که آنزیم‌های سم‌زدای استراز، مونواکسیژناز و گلوتاتیون اس‌ترنسفراز در مقاومت بید کلم به فن‌والریت نقش دارند. جهت اندازه‌گیری میزان فعالیت آنزیم‌های گلوتاتیون اس‌ترنسفراز، استراز و مونواکسیژناز به ترتیب از روش‌های (Habig et al., 1976)، (Van Asperen, 1962) و (De Sousa et al., 1995) با اندکی تغییرات استفاده شد. نتایج آزمون‌های بیوشیمیایی نشان داد که فعالیت آنزیم‌های استراز، سیتوکروم P450 و گلوتاتیون اس‌ترنسفراز در جمعیت مقاوم به ترتیب 2، 75/1 و 6/8 برابر جمعیت حساس بود. با توجه به نقش GST در مقاومت بید کلم به فن‌والریت، بیان شش ژن GST با استفاده از q-PCR مورد بررسی قرار گرفت. تغییرات بیان ژن‌های مختلف GST در جمعیت‌های مختلف می‌تواند حاکی از نقش این ژن‌ها در مقاومت به حشره‌کش فن‌والریت در بید کلم باشد. نتایج به طور کلی نشان داد که آنزیم‌های سم‌زدای استراز، مونواکسیژناز و گلوتاتیون اس‌ترنسفراز در مقاومت بید کلم به فن‌والریت نقش دارند. این نتایج به ما جهت شناخت مکانیسم‌های دخیل در مقاومت و در نتیجه مدیریت مقاومت این آفت مهم کمک خواهد کرد.
کلیدواژه ها
موضوعات
 
Title
Biochemical mechanisms of insecticide resistance to fenvalerate in diamondback moth, Plutella xylostella L. (Lep.: Plutellidae) in four regions of Iran
Authors
zahra sayani, Azam Mikani, Hadi Mosallanejad
Abstract
The diamondback moth, Plutella xylostella is one of the most distributed and damaging pest of cruciferous crops in Iran, and is controlled almost by pyrethroids. One of this insecticide which is used for controlling this pest is fenvalerate. Some population of P. xylostella have become resistant to fenvalerate due to intensive use of this insecticide. Up to now, there is no information about the mechanisms of resistance in this pest population to fenvalerate which can help us to resistance management of this serious pest. The toxicity of fenvalerate in four populations from different parts of Iran (Tehran, Alborz, Khoozestan and Isfahan) was determined using leaf dipping bioassay method. The bioassay results showed significant difference in susceptibility to fenvalerate among the populations. Resistance ratio of different populations to the susceptible one ranged from 3.1 to 9.5. Synergist experiments was conducted using piperonyl butoxide (PBO), diethyl maleate (DEM) and triphenyl phosphate (TPP) to determine whether mixed function oxidases, glutathione S-transferases and esterases were involved in resistance mechanisms, respectively. The level of resistance to insecticide was suppressed by PBO, DEM and TPP which confirmed that resistance to fenvalerate is mainly caused by detoxification enzymes. In order to determine the glutathione S-transferases, cytochrome P450 monooxygenase and esterase activities the methods of Van Asperen (1962), Habig et al. (1976) and De Sousa et al. (1995) were used with some modification, respectively. Cytochrome P450 monooxygenases activity increased 1.75 fold in resistant strain comparing with susceptible one. Up to 8.6- fold and 2-fold increase in glutathione S-transferase (GST) and esterase activities in resistant strains compared with the susceptible one was observed respectively. The real-time quantitative PCR (q RT PCR) reactions were conducted to show the expression level of GSTs. The changes in P. xyllostella GST gene expression levels exposed to fenvalerate indicate that they play important role in resistance to this insecticide. Overall, this study showed that the mechanisms of insecticide resistance in dimondback moth populations in four regions in Iran were related to cytochrome P450 monooxygenases, GST and esterase. This data help us to detect the mechanisms involved in resistance of P. xyllostella to fenvalerate and subsequently resistance management of this important pest.
Keywords
detoxification enzymes, Esterases, cytochrome P450 monooxygenase, Glutathione S-transferase, Peyrethroids