نخستین گزارش از چهار گونه Alternaria به عنوان اندوفیت گیاه Crataegus pentagyna
کد مقاله : 1593-23IPPC
نویسندگان
1گیلان-تالش-خیابان کشاورز-خیابان شهیدغنی زاده-خیابان معلم: جنب مدرسه مهر حیان-منزل شخصی رسولی 09383474428
2گروه گیاهپزشکی ، دانشگاه علوم کشاورزی و منابع طبیعی ساری،ایران
3گروه گیاھپزشکی ، دانشگاه علوم کشاورزی و منابع طبیعی ساری، ساری، ایرن
4گروه گیاهپزشکی ، دانشگاه علوم کشاورزی و منابع طبیعی ساری، ساری، ایران
چکیده
Alternaria یک قارچ همه جازی است که دارای گونههای ساپروفیتی، اندوفیتی و بیماری زاست. قارچهای اندوفیت گروهی از قارچها هستند که درون بافتهای گیاهان زندگی میکنند بدون اینکه موجب هر گونه بیماری یا خسارتی در آنها شوند. به منظور شناسایی قارچهای اندوفیت درختان Crataegus pentagyna طی سالهای 95-96 نمونهبرداری از سر شاخه درختان سالم تالش صورت گرفت. جهت ضدعفونی اولیه نمونهها ابتدا با آب جاری شسته و پس از جداسازی پوست رویی، بخش چوب به قطعات نیم سانتیمتر تقسیم شدند. برای ضدعفونی سطحی به ترتیب از اتانول 75% به مدت یک دقیقه، هیپوکلریت سدیم با ماده موثرهی 2% به مدت سه دقیقه، اتانول 75% به مدت یک دقیقه و سه بار شستشو با آب مقطر استریل استفاده شد و پس از خشک شدن روی کاغذ صافی استریل در پتری حاوی محیط کشت PDA به مدت چهار هفته در انکباتور با دمای 25 درجه سلسیوس نگهداری شدند. نمونهها پس از رشد به روش تک اسپور و نوک هیف خالص سازی شدند. براساس خصوصیات مورفولوژیکی، و بررسیهای مولکولی تمامی جدایههای بدست آمده شناسایی شدند. در بین نمونهها قارچهای جنس آلترناریا بر اساس خصوصیات ریختشناسی کنیدیوم، کنیدیوفور و الگوی اسپور زایی جدایهها روی محیط کشت PCA مورد شناسایی مورفولوژیکی قرار گرفتند. به منظور تایید مطالعات مورفولوژیکی ناحیه rDNA ITS نمونهها با آغازگرهای ITS4 و ITS5 تکثیر و توالییابی شدند. نتایج بررسی مولکولی موید نتایج بررسی مورفولوژیکی بود. این مطالعه اولین گزارش از چهار گونهی A.infectoria، A.citri، A.burnsii، A.alternata روی درختان Crataegus pentagyna در ایران میباشد و همچنین این سه گونه برای اولین بار به عنوان قارچ اندوفیت درختان Crataegus pentagyna گزارش میشوند.
کلیدواژه ها
موضوعات
Title
First report of four Alternaria species as Crataegus pentagyna endophytic fungi in Iran
Authors
Farahnaz Rasouli Miankouh, Mohammad Ali Tajik Ghanbari, Heshmatullah Rahimian, Valiollah Babaezad
Abstract
Alternaria is a ubiquitous fungal genus that includes saprobic, endophytic and pathogenic species. Fungal endophytes are group of fungi that internally infect living plant tissues whithout causing any visible manifestation of disease. In order to identify the endophytic fungi from Crataegus pentagyna trees, during the 2015-2016 years, samples were taken from brauches of healthy Crataegus pentagyna trees of Talesh. For initial disinfection, samples were primarily washed with tap water and After separation of bark from wood, wood fragments were cut into small pieces of .5 cm. Samples were surface sterilized whit 75% ethanol(v/v) for 1 min, 2% sodium hypochlorite (v/v) for 3 min and 75% ethanol(v/v) for 1 min respectively, and then washed three times whit autoclaved water, and then drying in a sterile filter paper samples were plated onto PDA culture medium and incubated at 25°C for 4 weekes. The samples were purified by single spore and hyphal tip methods after growth. All of fungi was consistently identified on the basis of morphological characteristics. Among the samples, the fungi of the genus Alternaria were identified based on morphological features of Conidium, Conidiophore and Sporulation pattern of specimens were identified on the PCA medium. In order to molecular identification the Internal Transcribed Spacer (ITS) regions of ribosomal DNA was amplified using ITS4 and ITS5 primer pairs.Morphological identifications of these isolates were confirmed by sequense analysis. This is the first report of A.infectoria, A.citri, A.burnsii, A.alternata on Crataegus pentagyna trees from Iran. Also, all identified endophytic fungi are reported from Crataegus pentagyna for the first time.
Keywords
Endophyt, Crataegus pentagyna, Alternaria