گزارش چهار گونه از جنس Aporcelaimellus Heyns,1965 از استان آذربایجان شرقی

کد مقاله : 1572-23IPPC
نویسندگان
1آ.ش- تبریز-اسکو گنبرف-
2گروه گیاهپزشکی. دانشکده کشاورزی. دانشگاه تبریز
3دانشگاه تبریز، بلوار 29 بهمن، تبریز
چکیده
به منظور شناسایی نماتدهای انگل گیاهی و آزاد‌زی استان آذربایجان‌شرقی، تعدادی نمونه خاک از فراریشه پوشش گیاهی این استان در سال‌های 95 و 96 جمع‌آوری شد. نماتدها با استفاده از روش‌های رایج، استخراج و با روش دگریسه تثبیت و به گلیسرین خالص انتقال یافتند. پس از تهیه اسلاید میکروسکوپی دائم، شناسایی نمونه‌ها بر اساس مشخصات ریخت‌شناختی و داده‌های ریخت‌سنجی انجام شد. برای شناسایی مولکولی، DNA نماتدها استخراج و با استفاده از نشانگر ناحیه ژنی D2-D3 28S rDNA تکثیر شده و بعد از توالی‌یابی، رسم درخت نسب‌زایی با استفاده از نرم‌افزارهای 2.3 MrModel test و Mrbayes صورت گرفت. در نتیجه، چهار گونه Aporcelaimellus medius ، Aporcelaimellus baeticus، Aporcelaimellus sp. و Aporcelaimellus obtusicaudatus شناسایی شدند که سه گونه اول برای فون نماتدهای ایران جدید است. جنس Aporcelaimellus از خانوادهAporcelaimidae ، دارای بدنی قوی، کوتیکول دارای دو لایه متفاوت از لحاظ ضخامت، حلقه هادی ساده و چین‌خورده، ادونتواستایل کوتاه و ضخیم و دارای دهانه‌ای اغلب به اندازه بیش از نصف طول آن، ادونتوفور میله‌ای‌شکل، ماده‌ها دارای دو لوله جنسی متقابل، فرج عرضی و دارای pars refringens به‌خوبی توسعه یافته، دم کوتاه، مخروطی گرد و در هر دو جنس مشابه است. گونه A. medius دارای بدنی قوی، به‌طول 1/3 تا 1/7 میلی‌متر که به ‌دلیل داشتن بدنی کوتاه از سایر گونه‌های این جنس مثل A. krygeri، A. obtusicaudatus، A. deserticola و A. brevicaudatus متمایز می‌گردد. گونه Aporcelaimellus sp. دارای بدنی استوانه‌ای به‌ طول2/02 تا 2/07 میلی‌متر، باریک‌شدگی در دو انتها، lacuna در ناحیه گردن به‌خوبی قابل رویت، محل اتصال مری به روده دارای یک زائده پشتی، دریچه بین مری و روده مخروطی، ماده‌ها دارای دو لوله جنسی متقابل با pars dilatata کاملا تمایز یافته، دم کوتاه، مخروطی، دارای هیالین کاملا مشخص در بخش انتهایی می باشد. این گونه بیشترین شباهت را با گونه‌های A. tenuis، A. waenga و A. daeserticola دارد. گونه A. baeticus دارای بدنی استوانه‌ای با اندازه متوسط بوده و به گونه A. obtusicaudatus بسیار شبیه است و تنها با داشتن ادونتواستایل کوتاه‌تر از آن قابل تفکیک است. از A. clamus به‌ دلیل موقعیت جلوتر هسته‌های غدد مریایی و از A.punctatus با داشتن عرض ناحیه لبی کمتر و گردن بلندتر و از A. samarcandicus به دلیل طول بدن بیشتر، گردن نسبتا کوتاه‌تر مشخص می‌گردد. در این تحقیق شناسایی مولکولی دو گونه A. baeticus و A. obtusicaudatus نیز انجام گرفت. این دو گونه جزو گونه‌های مخفی (cryptic) محسوب می‌شوند و تنها به واسطه واکاوی مولکولی از هم قابل تفکیک هستند و در تبار‌نمای رسم شده در دو خوشه مجزا از هم قرار گرفتند.
کلیدواژه ها
موضوعات
 
Title
Four species of Aporcelaimellus Heyns, 1965 from East Azarbaijan province, Iran
Authors
ali abdi gonbary, arezoo naghavi, Gholamreza Niknam
Abstract
In order to identify plant parasitic and free-living nematodes, several soil samples were collected from the rhizosphere soil of vegetation of East Azarbaijan province, during 2016 and 2017. The nematodes were extracted using classic nematology techniques, fixed with the De Grisse method and transferred to pure glycerin. Microscopic slides from the nematodes were prepared and the nematodes identified based on morphological and morphometric characteristics. In the molecular section, the DNA of nematodes were extracted and amplified using primers related to D2-D3 segment of 28S rDNA gene, after sequencing, drawing of the phylogenetic tree was made by MrModel test 2.3 and Mrbayes softwares. As a result, four species, Aporcelaimellus medius, Aporcelaimellus baeticus, Aporcelaimellus sp. and Aporcelaimellus obtusicaudatus were identified, in wich the first three species are new for Iran nematode fauna. The genus Aporcelaimellus belongs to the family Aporcelaimidae with a plump body, cuticle consisting of two distinct layers of different refraction, guiding ring simple and wrinkled, odontostyle short and thick, aperture generally occupying more than half of its length, female gonads paired, vulva transverse with well developed pars refringens, tail short, conoid-rounded, and similar in both sexes. Aporcelaimellus medius has a plump body with 1.3 -1.7 mm length that differs from other species of this genus, such as A. krygeri, A. obtusicaudatus, A. deserticola, and A. brevicaudatus because of its shorter body. Aporcelaimellus sp has a cylindrical body with 2.02 to 2.7 mm length, narrowing at the two ends, lacuna is well visible in the neck area. Pharyngo-intestinal junction bearing a distinctly developed dorsal lobe, cardia conical, females having two ovaries with a completely distinct pars dilatat, tail short - conoid, with well-defined hyaline at the end. This species is most similar to A. tenuis, A. waenga and A. daeserticola. The species A. baeticus has a medium sized cylindrical body that is very similar to A. obtusicaudatus but is distinguished only by shorter odontostyle. This spesies differs from A. clamus because of its anterior position of oesophageal glands nuclei and it can be distinguished from A. punctatus in less labial width, longer neck. A. baeticus has a longer body and a shorter neck than A. samarcandicus. In this study, molecular identification was performed only for A. baeticus and A. obtusicaudatus, these two species are very close to each other and are considered cryptic species, so that, they could only be separated by molecular analysis as they were placed in two separate clades in the phylogenetic tree.
Keywords
cryptic, D2-D3, Free- living, Molecular identification