مهار زیستی ویروس موزاییک توتون با استفاده از باکتری‌های القاکننده رشد در میزبان گوجه‌فرنگی

کد مقاله : 2050-23IPPC
نویسندگان
1شهران بلوار کوهسار خیابان طبیعت -مجتمع ستاره -واحد 21
2گروه گیاه پزشکی، دانشگاه علوم کشاورزی و منابع طبیعی رامین
3گروه گیاه پزشکی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه شهید چمران اهواز
چکیده
گوجه‌فرنگی همواره تحت تأثیر عوامل بیماری‌زای گیاهی ازجمله ویروس‌ها قرار دارد. ویروس موزاییک توتون (TMV)ازجمله ویروس‌هایی به شمار می‌رود که تولید محصول گوجه‌فرنگی را به‌شدت کاهش داده است. استفاده از باکتری‌های افزایش‌دهنده ‌رشد (PGPR) ازجمله روش‌های مهار زیستی ویروس‌هاست که امروزه اهمیت زیادی دارد. آزمایش حاضر جهت تعیین ترکیب مناسب باکتری‌های القاکننده رشد جهت ممانعت از تکثیر TMV در میزبان گوجه‌فرنگی صورت گرفت. ابتدا بذر گوجه‌فرنگی در گلدان‌های حاوی خاک اتوکلاو شده کشت داده ‌شدند. جدایه‌های باکتریایی Pseudomonas putida، P. flourescens و B. subitilis پس از اثبات خاصیت عدم آنتاگونیستی، در محیط کشت NA کشت داده‌شده و سوسپانسیونی با حجم 100 میلی‌لیتر و غلظت 108 واحد تشکیل‌دهنده کلنی در میلی‌لیتر، تهیه شد. پس از رشد گیاهچه‌ها، غلظت معینی از سوسپانسیون باکتری‌های به‌ فرا ریشه‌ی گلدان‌ها اضافه شد. سپس گیاهچه‌ها باTMV مایه‌زنی و به مدت چهار تا شش هفته جهت ظهور علائم نگهداری شدند. تیمارهای شاهد شامل شاهد منفی (گیاه مایه‌زنی شده با بافر فسفات) و شاهد مثبت (گیاه مایه‌زنی شده با TMV) بودند. پس از گذشت شش هفته میزان چگالی نوری (OD) در آزمون الایزای غیرمستقیم با استفاده از آنتی‌بادی چند همسانه‌ای تولیدشده علیه TMV در طول‌موج 405 نانومتر به‌عنوان شاخصی برای نشان دادن تجمع ویروس در گیاهان آلوده ثبت شد. طرح آماری استفاده‌شده در این آزمایش، طرح کاملاً تصادفی با 10 تیمار و شش تکرار بود و داده‌ها با استفاده از نرم‌افزار SAS واکاوی شدند. نتایج نشان داد که در تیمار ترکیب سه باکتری‌ Pseudomonas putida، P. flourescens و B. subitilis میزان OD کم‌تری (08/0) نسبت به شاهد مثبت (78/0)، مشاهده شد (05/0 p<). همچنین در تیمار باکتری B. subitilis نسبت به شاهد منفی، میزان OD بیشتری (45/0) مشاهده شد (05/0 p<). نتایج نشان داد که ترکیبی از باکتری‌های PGPR دارای اثر هم‌افزایی بوده و در کاهش غلظت ویروس TMV در میزبان، از سایر تیمارها موفق‌تر عمل می‌کند.
کلیدواژه ها
موضوعات
 
Title
Biocontrol of Tobacco mosaic virus using plant growth promoting bacteria in tomato
Authors
Milad Aeiniqf, Mohamad Hamed Ghodum Parizipour, parnian pooladi
Abstract
Various plant pathogens such as viruses always cause damage to tomato throughout the word. Tobacco mosaic virus (TMV) is considered as the most devastating virus which significantly reduces the tomato yield. Application of plant growth promoting bacteria (PGPR) has been regarded as the promising method to control plant viruses. Therefore, this investigation aimed to find the efficient combination of PGPR strains to control TMV in tomato. Bacterial suspension with the volume of 100 milliliter were prepared and the concentration adjusted to 108 colony forming unit per milliliter. Tomato seeds were cultivated in autoclaved peat mass and tomato seedling were drenched with suspensions of Pseudomonas fluorescens, P. putidae, and B. subitilis at three-leaf stage. Afterwards, seedlings were inoculated with TMV and were inspected for symptoms till six weeks post inoculation. Then, optical density (OD) were recorded in Indirect-ELISA using polyclonal antibody produced against TMV as virus titer in infected plants at 405 nanometers. The experiment conducted in completely randomized design with 10 treatments and six replicates in each treatment. Control treatments were applied as follows: negative ( without inoculation of TMV) and positive control (TMV inoculated). The data were statistically analyzed using SAS software. The results showed that application of the aforementioned bacterial isolates was associated with lower OD (0.08) than that of positive control (0.87) in inoculated tomato plants (p<0.05). Also, application of B. subitilis resulted in higher OD (0.45) compared to negative control (p<0.05). The results showed that a combination of PGPR has synergistic effect on reducing TMV titer in tomato compared to other combinations.
Keywords
Inoculation, rhizosphere, ELISA, virus titer