سبب شناسی بدشکلی درختان نارگیل در استان هرمزگان

کد مقاله : 2043-23IPPC
نویسندگان
1خیابان رسالت جنوبی-کوچه عدالت دو-ساختمان فرنود دو-واحد 602
2مرکز تحقیقات و آموزش کشاورزی و منابع طبیعی هرمزگان
چکیده
در خرداد ماه سال 1396، علائم بدشکلی اندام‌های رویشی درختان نارگیل (Cocos nucifera) در بوستانی واقع در جزیره قشم در استان هرمزگان مشاهده شد. علائم بدشکلی شامل برگچه‌های دارای رشد بیش از اندازه، فشرده و چروکیده بود که به ایجاد برگ‌های تغییر شکل یافته، ضخیم و کوتاه منجر شد. لکه‌های کوچک قهوه‌ای تیره تا سیاه رنگی نیز روی برگچه‌ها و محور برگ مشاهده شد. قطعاتی از بافت‌های دارای علائم بیماری پس از ضدعفونی سطحی با محلول هیپوکلریت سدیم 2% به مدت سه دقیقه، سه مرتبه شستشو با آب مقطر سترون و خشک شدن روی کاغذ صافی سترون، روی محیط کشت سیب‌زمینی دکستروز آگار (PDA) حاوی 150 میکروگرم بر میلی‌لیتر استرپتومایسین سولفات قرار داده شدند و تشتک‌های پتری به مدت شش روز در دمای 28 درجه سلسیوس نگهداری شدند. پس از سه روز، جدایه‌های Fusarium به صورت غالب از بافت‌های دارای علائم بدشکلی به دست آمد. در محیط کشت PDA، میسلیوم هوایی پرگنه‌ها در ابتدا به رنگ سفید مشاهده شد که رنگ آن با افزایش سن پرگنه به ارغوانی-بنفش تغییر یافت. ماکروکنیدی‌ها باریک، دارای دیواره نازک، نسبتاً مستقیم و دارای 5-3 بند عرضی بودند. میکروکنیدی‌ها گرزی شکل، دارای یک پایه صاف و فاقد بند عرضی بودند که در زنجیره‌هایی با طول متغیر، سرهای کاذب و یا اجتماعی از تعداد اندکی میکروکنیدی به فراوانی در میسلیوم هوایی تشکیل شدند. یاخته‌های کنیدیوم‌زا دارای یک یا بیش از یک کانون کنیدیوم‌زایی بودند. خصوصیات ریخت شناسی جدایه‌ها با خصوصیات توصیف شده برای Fusarium proliferatum منطبق بود. شناسایی جدایه‌ها در سطح مولکولی از طریق تکثیر و توالی‌یابی ناحیه فاصله‌انداز رونویسی شونده داخلی (ITS1-5.8S-ITS2) و ژن رمزکننده فاکتور طویل‌ساز ترجمه (tef-1α) انجام شد. بر اساس نتایج جستجوی بلاست، توالی نوکلئوتیدی به دست آمده (Accession No. MH425306) با توالی مورد نظر از سایر جدایه‌های F. proliferatum (KY785020.1، FJ538242.1 و KU872092.1) موجود در مرکز ملی اطلاعات زیست فناوری (NCBI) دارای 100% مشابهت بود. به منظور اثبات بیماری‌زایی، دوایری به قطر سه سانتی‌متر از برگ‌های سالم و عاری از بیماری درختان نارگیل جدا شدند و در تشتک‌های پتری پوشش یافته با کاغذ صافی مرطوب سترون قرار داده شدند. قطعات آگار حاوی F. proliferatum روی سطح برگ‌ها قرار داده شد و تشتک‌های پتری در دمای 28 درجه سلسیوس در تاریکی نگهداری شدند. دوایر برگی شاهد با قطعات آگار فاقد قارچ مایه‌زنی شدند. شش روز پس از مایه‌زنی، علائم زردی همراه با لکه‌های بافت مرده جزئی در اطراف محل مایه‌زنی در دوایر برگی مشاهده شد که تا روز یازدهم به از بین رفتن تمام بافت برگ منجر شد. در دوایر برگی شاهد هیچ گونه علائم آلودگی مشاهده نشد. جداسازی F. proliferatum تنها از دوایر برگی مایه‌زنی شده با قارچ انجام شد. این مطالعه نخستین گزارش از وقوع بدشکلی نارگیل ناشی از F. proliferatum در دنیاست.
کلیدواژه ها
موضوعات
 
Title
Ethiology of coconut palm malformation disease in Iran
Authors
Azadeh Goudarzi, Abdoolnabi Bagheri
Abstract
In June 2017, symptoms of vegetative malformation on coconut palm (Cocos nucifera) trees were observed in a garden located in Qeshm island, Hormozgan province. Symptoms of malformation included hypertrophied, tightly grown and wrinkled leaflets, producing misshapen, thickened and dwarfed leaves. Dark brown to black small lesions were also observed on leaflets and rachises. Symptomatic tissue fragments were surface-disinfested with 2% sodium hypochlorite solution for 3 min, rinsed three times in sterile distilled water, dried on sterilised paper, and plated onto potato dextrose agar (PDA) supplemented with 150 μg ml−1 of streptomycin sulfate and petri dishes were incubated at 28 °C for 6 days. After three days, isolates of Fusarium were permanently obtained from malformed tissues. In culture, the aerial mycelium of the colonies was initially white, becoming purple-violet with age. Macroconidia were slender, thin-walled and relatively straight with 3-5 septa. Microconidia were club shaped with a flattened base and 0-septate that found in chains of varying length, false heads, or aggregates of a few microconidia. Conidiogenous cells were monophialides and polyphialides. The morphology of the isolates was identical to that described for Fusarium proliferatum. Isolates were identified at the molecular level by amplification and sequencing of the internal transcribed spacer region (ITS1-5.8S-ITS2) and translation elongation factor 1‐α (tef‐1α) gene. BLASTn search of the sequence (Accession No. MH425306) showed 100% identity with sequences of F. proliferatum (KY785020.1, FJ538242.1 and KU872092.1) obtained from National Center for Biotechnology Information (NCBI). To establish pathogenicity, discs (3 cm in diameter) were detached from healthy and disease-free leaves of coconut palm trees and placed on sterile petri dishes lined with sterile moist filter paper. Agar plugs containing F. proliferatum culture were placed directly on the adaxial side of the leaf discs and the plates were incubated in the dark, at 28 °C. Control leaf discs were inoculated with agar plugs free of the fungus. Six days after inoculation, leaf discs began showing chlorosis along with partial necrotic lesions around the inoculation site that resulted in complete necrosis of leaf tissue by 11 days of inoculation. No symptoms were observed on control leaf discs. F. proliferatum was reisolated only from inoculated leaf discs. This is the first report of coconut palm malformation disease caused by F. proliferatum in the world.
Keywords
coconut palm, Cocos nucifera, malformation, Fusarium proliferatum