جداسازی و شناسایی برخی قارچهای اندوفیت اندوفیت گیاهان رز و سماق در ایران
کد مقاله : 1961-23IPPC
نویسندگان
حسن ارزانی 1 ، عارف مرادپور2 ، رسول اکبرپور2 ، حبیب الله بهلول زاده2 ، سالار استاد علی2 ، فرشته کرمی3 ، امید اتقیا4 ، خلیل بردی فتوحی فر2
1سبزوار خیابان داورزنی داورزنی ۲
2دانشگاه تهران
3استان آذربایجان غربی- شهرستان شاهیندژ- خیابان پاسداران- کوچه ی دوم
4کرج- چهار راه مصباح – بلوار امامزاده حسن – ساختمان بنیان – پلاک 796 – طبقه چهارم – واحد 16- کد پستی 3134758635
چکیده
سماق (Rhus coriaria) بزرگترین جنس از تیره پسته، Anacardiaceae و شامل بیش از 100 گونه میباشد. تنها یک گونه خودرو از این جنس در ایران به نام سماق دیده میشود که در مناطق کوهستانی ایران وجود دارد. سماق، گیاهی درختچه ای یا درختی کوتاه با برگ های خزاندار است و از جنبه های صنعتی، خوراکی، زینتی و مصارف پزشکی و دارویی اهمیت و ارزش دارد. رز ((Rosa hybrid از خانواده ی گل سرخیان Rosaceae نیز جز مهم ترین گیاهان زینتی در دنیا میباشد. اغلب گیاهان که در اکوسیستم های طبیعی مطالعه شده اند بوسیله ی قارچ هایی که علایمی ایجاد نمیکنند، کلنیزه میشوند که اندوفیت نامیده می شوند. در طی پاییز 1396، نمونه های گیاهی بدون علائم و سالم از برگ و ساقه رز در شهرستان کرج استان البرز و سماق در شهرستان سبزوار استان خراسان رضوی جمع آوری و به آزمایشگاه منتقل گردید. نمونه های گیاهی به مدت 15 دقیقه زیر جریان ملایم آب شیر با توری شسته شدند. سپس چهار تا پنج مرتبه با آب مقطر استریل آب شویی گردیدند. نمونه های گیاهی به منظور ضد عفونی سطحی، به مدت یک دقیقه در اتانول 70 درصد قرار داده شدند. سپس نمونههای برگ به مدت یک دقیقه در محلول هیپوکلریت سدیم دو درصد و نمونههای شاخه به مدت سه دقیقه در این محلول قرار داده شدند. در ادامه نمونهها با آب مقطر استریل شستشو داده شدند و دوباره یک دقیقه در اتانول 70 درصد ضد عفونی شده و در نهایت با آب مقطر استریل شسته شدند. نمونههای گیاهی پس از خشک شدن روی دستمال کاغذی سترون، به قطعات کوچک بریده شدند و روی محیط کشت آب آگار دو درصد قرار داده شدند و در انکوباتور در شرایط تاریکی و دمای 25 درجه سلسیوس به مدت 14 روز نگهداری شدند. قارچ های اندوفیت رشد کرده جداسازی، خالص سازی و نگهداری گردید. در مجموع 14 جدایه قارچی استحصال گردید. پس از شناسایی اولیه جنسهای قارچی اندوفیت، به منظور شناسایی گونه، جدایهها بر روی محیط کشت های اختصاصی و استاندارد کشت داده شدند. بر اساس ویژگیهای ریخت شناختی و تجزیه و تحلیلهای مولکولی براساس ناحیه ژنیومی
ITS-rDNA، آرایههای قارچی Alternaria alternata و .Tricharina sp در گیاه سماق و آرایههای قارچی Aspergillus flavus ،Cytospora ribis ، sp. Microsphaeropsis و Petriella sp. در گیاه رز به عنوان اندوفیت شناسایی شدند. تمامی آرایه های شناسایی شده در این تحقیق برای نخستین بار به عنوان قارچ اندوفیت از سماق در دنیا و از رز در ایران گزارش میشوند.
ITS-rDNA، آرایههای قارچی Alternaria alternata و .Tricharina sp در گیاه سماق و آرایههای قارچی Aspergillus flavus ،Cytospora ribis ، sp. Microsphaeropsis و Petriella sp. در گیاه رز به عنوان اندوفیت شناسایی شدند. تمامی آرایه های شناسایی شده در این تحقیق برای نخستین بار به عنوان قارچ اندوفیت از سماق در دنیا و از رز در ایران گزارش میشوند.
کلیدواژه ها
موضوعات
Title
Isolation and identification of some endophytic fungi from Rose and Sumac
Authors
Hasan Arzani, Aref Moradpour, Rasool Akbarpour, Habib Allah Behlolzadeh, Salar Ostadali, Fereshteh karami, Omid Atghia, Khalil Berdi Fotouhifar
Abstract
Rhus coriaria belongs to Anacardiaceae family. This genus is the largest genus of family and includes more than 100 species, and only one species of this genus is known in Iran as sumac, which is located in the mountainous regions of Iran. Sumac is a shrub or deciduous tree and important in terms of industrial, edible, ornamental and medical and pharmaceutical uses. Rosa hybrid belonging to Rosaceae family, which is one of the most important ornamental plants in the world. Most plants that have been studied in natural ecosystems are colonized by fungi that do not cause symptoms, so call as endophyte. During autumn of 2017, some specimens were collected from healthy leaves and twigs without any symptoms of rose plants from karaj city, Alborz provinces and sumac plants from Sabzevar city, Razavi Khorasan Province, Iran and transferred to the lab. These specimens washing with running tap water for 15 min and four and five times with sterile distilled water, plant materials surface sterilized with 70% ethanol for 1 min, 2% sodium hypochlorite solution for 1 min for leaves and 3 min for twigs, then rinsing with sterile distilled water for 1 min and 70% ethanol for 1 min, followed by final rinsing with sterile distilled water for 1 min. Plant materials were cut in small pieces after drying and were placed on 2% WA and were incubated in continuous dark condition at 25ºC for 14 days. The endophytic fungi were grown, isolated, purified and maintained. A total number of 14 isolates were isolated. After initial detection of endophytic fungi, isolates were cultured on specific media for identification of the species. Based on morphological characteristics and molecular analysis with ITS-rDNA sequences, different fungal taxa including Alternaria alternata and Tricharina sp. in sumac plants and Aspergillus flavus, Cytospora ribis, Microsphaeropsis sp., Petriella sp. in rose plants as endophytes were identified. All identified taxa are reported for the first time as new endophytic fungi of sumac in the world and rose in Iran.
Keywords
morphology, molecular, ITS-rDNA, Biodiversity