گزارش جدیدی از مرحله فیالید دار Humicola fuscoatra از درختان سدر و گونه Cephalothrichum verrucisporum از خاک برای میکوبیوتای ایران
کد مقاله : 1948-23IPPC
نویسندگان
1استان آذربایجان غربی- شهرستان شاهیندژ- خیابان پاسداران- کوچه ی دوم
2کرج- چهار راه مصباح – بلوار امامزاده حسن – ساختمان بنیان – پلاک 796 – طبقه چهارم – واحد 16- کد پستی 3134758635
3کرج - خیابان دانشکده، پردیس کشاورزی و منابع طبیعی دانشگاه تهران، گروه گیاهپزشکی، کدپستی: 3158777871
چکیده
در طی سال 1396 از شاخه ی درختان سدر (.Cedrus sp) با علائم سرخشکیدگی (dieback) در منطقه ولنجک و همچنین خاک درختان میوه در دو عمق 30-0 و 60-30 سانتی متر در منطقه رباط کریم استان تهران نمونه بردای به عمل آمد. قطعات شاخه دارای علائم پس از ضدعفونی با محلول هیپوکلریت سدیم رقیق شده 1% ، با آب مقطر استریل شسته و بعد از خشک شدن روی دستمال کاغذی سترون، روی محیط غذایی آب-آگار 2% و PDAکشت داده شدند. ده گرم از خاک همگن شده به 200 میلی لیتر آگار 05/0% اضافه گردید و به مدت 20 دقیقه با شیکر مخلوط گردید. این مخلوط به مدت 30 دقیقه ساکن گردید تا بخش جامد آن رسوب کند. سریال از محلول رویی رقت های 1-10، 2-10 و 3-10 تهیه گردید. از هر رقت سه تکرار روی محیط غذایی WA، PDA و CMA کشت گردید. پس از خالص سازی و شناسایی جدایه‌های قارچی بدست آمده از رقت ها، قارچ بیمارگر گیاهی جداسازی نگردید. با استفاده از منابع معتبر قارچ شناسی دو جنسHumicola به دست آمده از شاخه‌ی درختان سدر و جنس Cephalotrichum از خاک شناسایی گردید. به منظور شناسایی گونه، حلقه‌هایی به قطر پنج میلی متر از حاشیه پرگنه‌های در حال رشد به محیط آرد یولاف-آگار (OA) و عصاره مالت -آگار (MEA) منتقل گردید. تشتک‌های پتری تلقیح شده به مدت 10 روز تحت شرایط تاریکی و دمای 25 درجه سلسیوس نگهداری شدند. در نهایت، پس از تلفیق داده های مربوط به ویژگی های ریخت شناختی و تعیین توالی ناحیه ی ژنی ITS-rDNA، گونه ی فیالید دار
H. fuscoatra از شاخه‌ی سدروس و گونه سینمادار C. verrucisporum از خاک، با 99 درصد تشابه از نظر توالی نوکلئوتیدی با جدایه‌های بانک ژن شناسایی گردید. نرخ رشد پرگنه در گونه H. fuscoatra در روی محیط غذایی MEA حدود 25 میلی متر و در روی محیط OA حدود 27 میلی متر، رنگ پرگنه در مرکز خاکستری و به طرف انتها روشن تر می‌باشد. آلئوروکنیدیوم‌ها به رنگ قهوه ای تیره و با اندازه 8-5 × 11-6 میکرومتر بودند. همچنین این گونه دارای کلامیدوسپور و فیالیدهایی کشیده و منفرد با اندازه 7- 3 × 14-9 میکرومتر است. مرحله فیالیددار این گونه تاکنون در ایران گزارش نشده بود. نرخ رشد پرگنه در گونه C. verrucisporum در روی محیط MEA حدود 52 میلی متر و در روی محیط OA قطری حدود 46 میلی متر، رنگ پرگنه در مرکز خاکستری تیره و به طرف انتها سفید شیری است. این گونه تولید اندام سینما قهوه ای تیره با اندازه 2800-360 میکرومتر می‌کند. کنیدیوم‌ها قهوه ای تیره با اندازه 7-5 × 5-3 میکرومتر می‌باشند. این مطالعه اولین گزارش از وجود مرحله فیالید دار H. fuscoatra از درختان سدر و همچنین گونه C. verrucisporum از خاک برای میکوبیوتای ایران می‌باشد.
H. fuscoatra از شاخه‌ی سدروس و گونه سینمادار C. verrucisporum از خاک، با 99 درصد تشابه از نظر توالی نوکلئوتیدی با جدایه‌های بانک ژن شناسایی گردید. نرخ رشد پرگنه در گونه H. fuscoatra در روی محیط غذایی MEA حدود 25 میلی متر و در روی محیط OA حدود 27 میلی متر، رنگ پرگنه در مرکز خاکستری و به طرف انتها روشن تر می‌باشد. آلئوروکنیدیوم‌ها به رنگ قهوه ای تیره و با اندازه 8-5 × 11-6 میکرومتر بودند. همچنین این گونه دارای کلامیدوسپور و فیالیدهایی کشیده و منفرد با اندازه 7- 3 × 14-9 میکرومتر است. مرحله فیالیددار این گونه تاکنون در ایران گزارش نشده بود. نرخ رشد پرگنه در گونه C. verrucisporum در روی محیط MEA حدود 52 میلی متر و در روی محیط OA قطری حدود 46 میلی متر، رنگ پرگنه در مرکز خاکستری تیره و به طرف انتها سفید شیری است. این گونه تولید اندام سینما قهوه ای تیره با اندازه 2800-360 میکرومتر می‌کند. کنیدیوم‌ها قهوه ای تیره با اندازه 7-5 × 5-3 میکرومتر می‌باشند. این مطالعه اولین گزارش از وجود مرحله فیالید دار H. fuscoatra از درختان سدر و همچنین گونه C. verrucisporum از خاک برای میکوبیوتای ایران می‌باشد.
کلیدواژه ها
موضوعات
Title
A new report of phialidic phase of Humicola fuscoatra from cedar trees and species of Cephalothrichum verrucisporum from soil for Iranian mycobiota
Authors
Fereshteh karami, Omid Atghia, Mohammad Javan-Nikkhah
Abstract
During 2017, samplings were conducted on twigs of cedar trees showing dieback symptoms in Velenjak as well as the soil of fruit trees at 0-30 and 30-30 cm depth in Robat Karim of Tehran province. Twigs with dieback symptoms were surface-sterilized with 1 % Sodium Hypochlorite Solution, rinsed in distilled water and were placed on 2% Water Agar (WA) and PDA media after drying. Ten gram of air-dried and homogeneous soil added to 200 ml of 0.05 and mixed for 20 minutes. The mixture was allowed to be stable for 30 minutes until the solid portion was precipitated and the serial dilutions were prepared. Every dilution, was spread on WA, PDA (Potato Dextrose Agar) and CMA (corn meal agar) media in three replicates. After purification and identification of the isolates, the pathogenic fungi were not isolated and identified. Using related descriptions, two genus Humicola from twigs of cedar trees and the genus Cephalotrichum from soil were identified. To identify the Humicola and Cephalotrichum species, the isolates were cultured on oatmeal-agar (OA) and Malt Extract Agar (MEA) media. The culture were kept for 10 days under dark conditions and at 25 °C. Finally, after combining morphological criteria and sequencing of ITS-rDNA, a phialidic species H. fuscoatra from twigs of cedar trees and cinnematous species C. verrucisporum from the soil with 99% similarity to strains of genebank, were identified. The growth rate of colony of H. fuscoatra on MEA reached about 25 mm and on OA about 27 mm, was gray in the center and brighter to the end. Alurioconidia were dark brown, 6-11× 5-8 μm. It also has chlamydospores and single-stranded phialides, 14-9×3-7 μm. The phialidic phase of this species still hasn't been reported in Iran. The colony of C. verrucisporum on MEA about 52 mm, and about 46 mm on OA, dark gray in the center and white to the end. This species produces a dark brown cinnemata body, 360-2800 μm. Conidia dark brown, 3-5 × 5-7 μm. This study is the first report of phialidic phase of H. fuscoatra and also species of C. verrucisporum for mycobiota of Iran.
Keywords
Identification, morphology, Molecular phylogeny, ITS-rDNA