قارچ‎های اندوفیت همزیست با گیاه دارویی ‏Ferula flabelliloba‏ جمع آوری شده از ارتفاعات زشک استان ‏خراسان رضوی
کد مقاله : 1840-23IPPC
نویسندگان
1مشهد. بلوار کوثر. کوثر 43 پلاک 4 واحد 3
2گروه علوم پزشکی، دانشکده داروسازی، دانشگاه علوم پزشکی مشهد، مشهد‏
3‏ گروه زیست شناسی و بیماری شناسی گیاهی، دانشگاه ایالتی نیوجرسی، راتگرز، آیالات متحده
چکیده
گونههای گیاه دارویی Ferula متعلق به خانواده چتریان، بومی نواحی مدیترانهای و آسیای مرکزی هستند که تاکنون قارچهای اندوفیت همراه آن در دنیا مورد بررسی قرار نگرفتهاند. از آنجا که قارچهای اندوفیت گیاهان دارویی در نتیجه همزیستی طولانی مدت با این گیاهان توانایی تولید متابولیتهای ثانویه جدید را به دست آوردهاند و از سویی استفاده از این قارچها برای تولید این ترکیبات ارزشمند بسیار آسانتر و مقرون به صرفهتر است در این تحقیق به جداسازی و شناسایی فلور قارچی همزیست با ریشه گونهی Ferula flabelliloba جمع آوری شده از ارتفاعات زشک خراسان رضوی پرداختیم. قطعات 1-5/0 سانتیمتری از بافت ریشه پس از شستشو با آب مقطر استریل و سه مرحله ضدعفونی با اتانول 70 درصد و هیپوکلریت سدیم نیم درصد، در محیط کشت PDA حاوی استرپتومایسین (20 میکروگرم / میلی لیتر) کشت و به مدت 14-7 روز در دمای 30-25 درجه سلسیوس قرار داده شدند. قارچهای رشد یافته به محیط WA منتقل و خالص سازی انجام شد. پس از استخراج DNA جدایهها، نواحی ITS-rDNA، LSU و Ef1α در آنها تکثیر و توالییابی گردید و با توالی سایر قارچهای موجود در بانک ژن مقایسه شد. توالیهای هر سه ناحیه تکثیر شده در بانک ژن ثبت گردید و کد ثبت دریافت شد. بر اساس شناسایی ریختشناسی و مولکولی جدایه ها متعلق به 7 جنس متفاوت بودند که گونههایnov. Muriphaesphaeria sp. و Cadophora sp. nov. برای دنیا جدید میباشند. سایر گونهها متعلق به Alternaria clamydosporigena ،Leucosphaerina arxii، Myrothecium sp.، Rhizoctonia solani و دو گونه Fusarium به نام F. solani و F. avenaceum بودند.
کلیدواژه ها
Cadophora sp. nov.&lrm؛ nov. &lrm؛ &rlm؛ Muriphaesphaeria sp.&lrm؛ Leucosphaerina arxii،&lrm؛ Myrothecium sp.&lrm؛ ، &rlm؛ LSU
موضوعات
Title
Endophytic fungi associated with Ferula flabelliloba‏ ‏collected from Zoshk hights, ‎Khorasan Province, Iran
Authors
Zahra Tazick, Mehrdad Iranshahi, James White
Abstract
Ferula spp., belong to Umbelliferae family, are medicinal plants which are mostly found in Mediterranean area and Central Asia. Several species of this genus have been used in folk medicine for their antispasmodic, carminative, digestive, expectorant, sedative, antihysteric, laxative, aphrodisiac, antiseptic ana analgestic activities. Their endophytic fungi have not been studied in the world, yet. Endophytic fungi associated with medicinal plants have the potential to produce new secondary metabolites, due to long-term coexistence with these plants. On the other hand, using the fungi to make these valuable compounds is much easier and more affordable. So, in this study, we tried to isolate and identify fungal symbiotic species of Ferula ovina collected from Zoshk hights of Khorasan Razavi province. Pieces of 0.5-1 cm from the root tissue were cultured on PDA containing streptomycin (20 µg/ml) after washing with sterile distilled water and three steps disinfection with 70% ethanol and 0.5% sodium hypochlorite. Then, they were incubated at 25-30 °C for 7 to 14 days. Grown fungi were transfered into the new plates containing WA media and puriffied. After DNA extraction of isolates, ITS, LSU and Ef1α regions were amplified, sequenced and compared to the sequences of other fungi in GeneBank. Sequences of all three replicated regions were recorded in the GeneBank and accession numbers received. Acording to morphological and molecoular identifications isolates were belong to 7 different genera which Muriphaesphaeria sp. nov. and Cadophora sp. nov. are first reports for the world. Other species were belonged to Leucosphaerina arxii, Alternaria clamydosporigena, Rhizoctonia solani, Myrothecium sp. and two Fusarium species, F. solani and F. avenaceum.
Keywords
Muriphaesphaeria sp. nov., Cadophora sp. nov., Leucosphaerina arxii, Myrothecium sp., LSU&lrm