قارچ‎های اندوفیت همزیست با گیاه دارویی ‏Ferula flabelliloba‏ جمع آوری شده از ارتفاعات زشک استان ‏خراسان رضوی

کد مقاله : 1840-23IPPC
نویسندگان
1مشهد. بلوار کوثر. کوثر 43 پلاک 4 واحد 3
2گروه علوم پزشکی، دانشکده داروسازی، دانشگاه علوم پزشکی مشهد، مشهد‏
3‏ گروه زیست شناسی و بیماری شناسی گیاهی، دانشگاه ایالتی نیوجرسی، راتگرز، آیالات متحده
چکیده
گونه‌های گیاه دارویی ‏Ferula ‎‏ متعلق به خانواده چتریان، بومی نواحی مدیترانه‎ای و آسیای مرکزی هستند که تاکنون قارچ‎های اندوفیت‎‏ ‏همراه آن در دنیا مورد بررسی قرار نگرفته‎اند. از آنجا که قارچ‌های اندوفیت گیاهان دارویی در نتیجه همزیستی طولانی مدت با این ‏گیاهان توانایی تولید متابولیت‌های ثانویه جدید را به دست آورده‌اند و از سویی استفاده از این قارچ‌ها برای تولید این ترکیبات ارزشمند بسیار ‏آسانتر و مقرون به صرفه‌تر است در این تحقیق به جداسازی و شناسایی فلور قارچی همزیست با ریشه گونه‎ی ‏Ferula flabelliloba‏ ‏جمع ‏‎آوری شده از ارتفاعات زشک خراسان رضوی پرداختیم. قطعات 1-5/0 سانتیمتری از بافت ریشه پس از شستشو با آب مقطر استریل ‏و سه مرحله ضدعفونی با اتانول 70 درصد و هیپوکلریت سدیم نیم درصد، در محیط کشت ‏PDA‏ حاوی استرپتومایسین (20 میکروگرم / ‏میلی لیتر) کشت و به مدت 14-7 روز در دمای 30-25 درجه سلسیوس قرار داده شدند. قارچ‎های رشد یافته به محیط ‏WA‏ منتقل و ‏خالص سازی انجام شد. پس از استخراج ‏‎ DNA‏ جدایه‎ها، نواحی ‏ITS-rDNA، ‏LSU‏ و ‏Ef1α‏ در آنها تکثیر و توالی‎یابی گردید و با توالی ‏سایر قارچ‎های موجود در بانک ژن مقایسه شد. توالی‎های هر سه ناحیه تکثیر شده در بانک ژن ثبت گردید و کد ثبت دریافت شد. بر ‏اساس شناسایی ریخت‎شناسی و مولکولی جدایه ها متعلق به 7 جنس متفاوت بودند که گونه‎هایnov. ‎‏ ‏Muriphaesphaeria sp.‎‏ و ‏Cadophora sp. nov.‎‏ برای دنیا جدید می‌باشند. سایر گونه‎ها متعلق به ‏Alternaria clamydosporigena‏ ،Leucosphaerina ‎arxii، ‏Myrothecium sp.‎، ‏Rhizoctonia solani‏ و دو گونه ‏Fusarium‏ به نام ‏F. solani‏ و ‏F. avenaceum‏ بودند. ‏
کلیدواژه ها
موضوعات
 
Title
Endophytic fungi associated with Ferula flabelliloba‏ ‏collected from Zoshk hights, ‎Khorasan Province, Iran
Authors
Zahra Tazick, Mehrdad Iranshahi, James White
Abstract
Ferula spp., belong to Umbelliferae family, are medicinal plants which are mostly found in Mediterranean area and ‎Central Asia. Several species of this genus have been used in folk medicine for their antispasmodic, carminative, ‎digestive, expectorant, sedative, antihysteric, laxative, aphrodisiac, antiseptic ana analgestic activities. Their ‎endophytic fungi have not been studied in the world, yet. Endophytic fungi associated with medicinal plants have ‎the potential to produce new secondary metabolites, due to long-term coexistence with these plants. On the other ‎hand, using the fungi to make these valuable compounds is much easier and more affordable. So, in this study, we ‎tried to isolate and identify fungal symbiotic species of Ferula ovina collected from Zoshk hights of Khorasan ‎Razavi province. Pieces of 0.5-1 cm from the root tissue were cultured on PDA containing streptomycin (20 µg/ml) ‎after washing with sterile distilled water and three steps disinfection with 70% ethanol and 0.5% sodium ‎hypochlorite. Then, they were incubated at 25-30‎‏ ‏‎°C for 7 to 14 days. Grown fungi were transfered into the new ‎plates containing WA media and puriffied. After DNA extraction of isolates, ITS, LSU and Ef1α regions were ‎amplified, sequenced and compared to the sequences of other fungi in GeneBank. Sequences of all three replicated ‎regions were recorded in the GeneBank and accession numbers received. Acording to morphological and ‎molecoular identifications isolates were belong to 7 different genera which Muriphaesphaeria sp. nov. and ‎Cadophora sp. nov. are first reports for the world. Other species were belonged to Leucosphaerina arxii,‎‏ ‏Alternaria ‎clamydosporigena, Rhizoctonia solani, Myrothecium sp. and two Fusarium species, F. solani and F. avenaceum.‎‏ ‏
Keywords
Muriphaesphaeria sp. nov., Cadophora sp. nov., Leucosphaerina arxii, Myrothecium sp., LSU&lrm