نخستین گزارش از Phytophthora taxon walnut به عنوان عامل پوسیدگی طوقه و ریشه‌ی پسته در ایران

کد مقاله : 1772-23IPPC
نویسندگان
1شیراز دانشکده کشاورزی دانشگاه شیراز بخش گیاهپزشکی
2دانشگاه شیراز- دانشکده کشاورزی- بخش گیاهپزشکی
چکیده
یکی از گروه‌های مهم و چالش‌برانگیز درخت فیلوژنتیکی فیتوفتورا، تبار شش گونه‌های این جنس است. به جز تعداد معدودی از گونه‏های این تبار مانند Phytophthora megasperma،P. gonapodyides ، P. rosacearum و P. taxon Asparagi بیشتر گونه‏های مربوط به آن تاکنون فقط از زیست‏بوم‏های جنگلی، ساحلی و مخازن آبیاری گزارش شده‌اند. طی نمونه‏برداری‏های انجام شده از درختان دارای علائم پوسیدگی طوقه و ریشه در باغات پسته استان‏های کرمان و یزد جدایه‏هایی با نقوش متفاوت حاصل از چندشکلی ساختاری تک‏رشته‏ی دی‏اِن‏اِی ریبوزومی مشاهده شد. کلیه‌ی جدایه‌های مورد بررسی متحمل به گرما بوده، قادر به تولید اسپورانژیوم‌های بدون پستانک، تخم‌مرغی، کشیده تا بیضوی، ناریزان، با افژولش داخلی و خارجی و در برخی جدایه ها دارای پایک و تورم در ساقه اسپورانژیوم بودند. جدایه‌های این گونه، دگرتال و دارای تیپ آمیزشی A1، اُاُگونیوم‏های گرد با دیواره‌ی صاف ،آنتریدیوم‌هایی پیراماده، اُاُسپورهای گرد و پُرساز بوده و کلیه‏ی جدایه‏ها در محیط‏کشت‏های مایع و جامد کلامیدوسپورهای میانی با دیواره‌ی نازک تشکیل دادند. در جدایه‌های به دست آمده فاصله‌ی ترانویسی‌شده‌ی داخلی دی‏اِن‏اِی ریبوزومی (آی‌تی‌اِس)، بتاتوبولین و زیرواحد یک سیتوکروم اکسیداز سی فزون‌سازی، خالص-سازی، توالی‌سنجی و ویرایش شد. نتایج واکاوی فیلوژنتیکی چندژن‌گاهی بر اساس روش بیشینه‌ی درست‌نمایی نشان داد که جدایه‏های مورد بررسی در یک گروه بوده، همگی همراه با توالی‌های P. taxon walnut مربوط به نخستین گزارش از این آرایه، جدا شده از درختان گردو در ایالات متحده‏ی آمریکا، در یک خوشه‌ی تک‌نیا تجمع یافتند. به منظور اثبات بیماری‏زایی در این بررسی گیاهچه‏های شش ماهه‌ی پسته‌و گردو با جدایه‌های مختلف بیمارگر مایه‏زنی شدند. پایه‌های آلوده به منظور مشاهده‌ی علائم بیماری شش ماه مورد بررسی قرار گرفته، صد در صد گیاهچه‏ها در مقایسه با شاهد علائم پوسیدگی طوقه و ریشه و پژمردگی و خشکیدگی سرشاخه‏ها را نشان دادند. نام‏گذاری رسمی این آرایه، به عنوان یکی دیگر از اعضای مهم بیمارگر تبار شش درخت فیلوژنتیکی فیتوفتورا، در دست بررسی است.
کلیدواژه ها
موضوعات
 
Title
First report of Phytophthora taxon Walnut as the causal agent of pistachio root and crown rot in Iran
Authors
zahra mirsoleymani, Reza Mostowfizadeh-Ghalamfarsa
Abstract
One of the most important and challenging clades in Phytophthora spp. phylogenetic trees is Clade six of these taxa. Except a few species such as Phytophthora megasperma, P. gonapodyides, P. rosacearum and P. taxon Asparagi most of the related species have only been reported from forests, riparian ecosystems and irrigation reservoirs. During sampling from trees with crown and root rot symptoms in pistachio orchards of Kerman and Yazd Provinces, Iran, isolates with various patterns from single-stranded structural polymorphism of the ribosomal DNA were observed. All isolates were high-temperature tolerate, produced non-papillate, ovoid, obovoid to ellipsoid, and non-caducous sporangia, with internal and external proliferation, in some isolates with pedicel and sporangiophore swelling. All examined isolates were heterothallic, mating type A1, smooth thick-walled globus oogonia with amphigynous antheridia, globus plerotic oospores and all isolates were produced intercalary thin-walled chlamydospores in both liquid and solid media. The rDNA internal transcribed spacers (ITS) region, β-tubulin and the mitochondrially encoded cytochrome oxidase subunit 1 genes were amplified, clarified, sequenced and edited for all isolates. Multiple gene genealogy phylogenetic analysis based on maximum likelihood approach showed that the studied isolates were clustered in one group, along with a sequences of P. taxon Walnut, attributed to the first report of this taxon, isolated from walnut trees in the United States of America, in a monophyletic branch. In order to confirm the pathogenicity of the isolates, six-month-old pistachio and walnut seedlings were inoculated with different isolates. The disease symptoms in infected rootstocks were observed for six months, one hundred percent of seedlings, showed crown and root rot, wilt and decline branches symptoms in comparison with the controls. The formal nomenclature of this taxon, as another important member of the Clade six of Phytophthora spp. phylogenetic trees, is under investigation.
Keywords
Key words: Clade six, Phytophthora spp. phylogeny, Pistachio tree pathogens