معرفی Cryptococcus adeliensis به عنوان عامل شانکر درختان میوه هسته‌دار در استان آذربایجان غربی

کد مقاله : 1660-23IPPC
نویسندگان
1آذربایجان غربی، شهرستان اشنویه
2گروه گیاهپزشکی دانشگاه شهید مدنی آذربایجان
چکیده
شانکر درختان میوه هسته‌دار یکی از عمده ترین و خسارت‌زا ترین بیماری‌های این درختان در دنیا محسوب می‌شود و از اکثر نقاط دنیا با عوامل مختلفی چون قارچ‌ها و باکتری‌ها گزارش شده است. در چند سال اخیر مخمر‌ها نیز به عنوان عامل شانکر درختان هسته‌دار در مناطقی از ایران گزارش شده‌اند. به منظور بررسی مخمر‌های عامل بیماری شانکر در شهرستان اشنویه در بهار سال 1396 از درختان میوه هسته‌دار نمونه برداری انجام گرفت. پس از انجام ضد عفونی سطحی شانکرهای جدا شده و خرد کردن آن‌ها در آب مقطر ،50 میکرولیتر از سوسپانسیون حاصل در محیط نوترینت سوکروز 2% به صورت مخطط کشت شد. کلنی‌های خمیری شکل انتخاب و در بررسی‌های میکروسکوپی تفکیک شدند.کلنی‌های خمیری شکل روی محیط کشت YPGA به صورت مدور و برجسته با رنگ صورتی روشن و سلول-های کروی به اندازه حدود 8-5 میکرومتر مشاهده شدند. جدایه‌ها روی برگ زردآلو و سرشاخه درختان هلو (رقم آلبرتا) و شلیل (رقم ردگلد)، در شرایط آزمایشگاه و طبیعی باغ اثبات بیماریزایی شدند. شناسایی جدایه‌های بیماریزا به روش‌های استاندارد مورفولوژیکی، فیزیولوژیکی، بیوشیمیایی و مولکولی انجام گرفت. برای شناسایی مولکولی جفت پرایمر D1/D2 از زیرواحد کوچک RNA ریبوزومی تکثیر و توالی یابی شدند. پس از ویرایش کردن، توالی‌ها با داده‌های بانکهای ژن (NCBI)، مقایسه شده و به منظور تایید شناسایی، درخت فیلوژنتیکی با استفاده از نرم افزار MEGA6 به روش اتصال همسایه‌ها (Neighbor joining) رسم شد. مخمر عامل بیماری شانکر درختان میوه هسته‌دار Cryptococcus adeliensis شناسایی شد. این اولین گزارش از ایجاد شانکر به وسیله Cryptococcus adeliensis در استان آذربایجان غربی است.
کلیدواژه ها
موضوعات
 
Title
Introducing Cryptococcus adeliensis as the causal agent of stone fruit canker in the West Azarbaijan province
Authors
shahab bayazidi, Akbar Shirzad, Vahid fallahzadeh, Alireza Alizadeh
Abstract
Canker disease of stone fruit trees which is one of the most serious and damaging diseases of these trees in the world, have been reported from many parts of the world with various causal agents such as fungi and bacteria. In recent years, yeast has been reported as stone fruits canker agent in some regions of Iran. In the spring of 2017, sampling of stone fruit trees was carried out to evaluate the canker caused by yeasts in the Oshnavieh region. After disinfestation of separated cankers and chopping in distilled sterile water, 50 μl of the suspension were streaked on the nutrient agar sucrose 2% medium. Yeast-like colonies were selected andscreened based on microscopic observations. The yaest-like colonies were circular and highlighted in light pink color on the YPGA medium and Spherical cells observed under microscope were about 8-5 micrometersPathogenicity of all yeast isolates were confirmed on apricot leaves and annual branches of peach trees (Elberta cultivar) and nectarine (Redgold cultivar) in vitro and garden. Identification of pathogenic strains was done by physiological, biochemical and molecular methods. Small subunit of ribosome RNA was amplified and sequenced by a pair of D1 / D2 primers . After editing, the sequences were compared with the Gene Bank (NCBI) and in order to confirm the identification, the phylogenetic tree was constructed using the MEGA6 software by Neighbor joining method. Yaest causal agent of stone fruit canker was identified as Cryptococcus adeliensis. this is the first report of canker caused by Cryptococcus adeliensis in West Azarbaijan province.
Keywords
D1/D2, Decline, yeast, paech, Phylogeny, Cryptoccocus